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摘要：本文是由ARC獸醫(yī)人員設(shè)計(jì)的小鼠麻醉指導(dǎo)原則，旨在提供一般建議。這并不意味著它包含了適用于小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉方案應(yīng)根據(jù)特定情況和研究需求與所在機(jī)構(gòu)的獸醫(yī)合作制定。本文是由ARC獸醫(yī)人員設(shè)計(jì)的小鼠麻醉指導(dǎo)原則，旨在提供一般建議。這并不意味著它包含了適用于小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉方案應(yīng)根據(jù)特定情況和研究需求與所在機(jī)構(gòu)的獸醫(yī)合作制定。

麻醉是使動(dòng)物完全或部分失去感覺(jué)，伴隨或不伴隨意識(shí)喪失。動(dòng)物可能需要麻醉進(jìn)行手術(shù)、可能引起疼痛的非手術(shù)操作，或需要固定的非疼痛操作。在麻醉前、麻醉過(guò)程中和麻醉后，必須采取措施確保動(dòng)物的安全和麻醉的有效性。

麻醉可通過(guò)胃腸外給藥或吸入給藥的方式進(jìn)行。藥物的選擇取決于具體操作、研究目的和其他因素，如動(dòng)物的年齡。對(duì)于新生小鼠，有些特別考慮下文進(jìn)行了概述。如對(duì)藥物選擇有疑問(wèn)，請(qǐng)咨詢所在機(jī)構(gòu)的獸醫(yī)。

01 麻醉的一般指導(dǎo)原則和注意事項(xiàng)

適應(yīng)期：建議所有動(dòng)物在運(yùn)輸后適應(yīng)一周，以防止應(yīng)激引起的反應(yīng)。動(dòng)物至少需要72小時(shí)才能恢復(fù)到基本生理狀態(tài)。

禁食：由于小鼠無(wú)法嘔吐，通常麻醉前無(wú)需禁食。然而，如需禁食(例如為了保持體重)，因小鼠的高代謝率，禁食時(shí)間不應(yīng)超過(guò)2-3小時(shí)。請(qǐng)注意，切勿限制飲水。

眼睛保護(hù)：在麻醉狀態(tài)下，小鼠的眼睛會(huì)持續(xù)睜開(kāi)，可能導(dǎo)致角膜干燥和損傷。因此，在如下條件下，應(yīng)涂抹眼膏(如Puralube? 或 Lacrilube?)來(lái)保護(hù)眼睛。

麻醉持續(xù)時(shí)間超過(guò) 5 min;

通過(guò)面罩進(jìn)行麻醉。

監(jiān)護(hù)：無(wú)論使用何種麻醉劑，均應(yīng)監(jiān)測(cè)麻醉狀態(tài)下的小鼠，以確保心臟和呼吸功能不被過(guò)度抑制，以及麻醉深度適當(dāng)。

在沒(méi)有專用設(shè)備的情況下，可以監(jiān)測(cè)以下麻醉小鼠的參數(shù)：

麻醉深度：通過(guò)掐指檢查;

呼吸頻率和模式：正常未受干擾的呼吸率約為 180 bpm，麻醉期間可接受 50% 的緩慢下降速率;

粘膜顏色：應(yīng)為粉紅色而非藍(lán)色或灰色;

體溫：可使用直腸溫度計(jì)監(jiān)測(cè)體溫，體溫應(yīng)保持在 36℃ 以上;

血氧飽和度和心率：可用專用的嚙齒類動(dòng)物脈搏式血氧儀監(jiān)測(cè)血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對(duì)監(jiān)護(hù)或監(jiān)護(hù)設(shè)備有任何問(wèn)題，請(qǐng)與所在機(jī)構(gòu)的獸醫(yī)聯(lián)系。

保溫：所有種屬在麻醉狀態(tài)下均存在低體溫的風(fēng)險(xiǎn)。小鼠由于體表面積與體重比高，尤其容易受到影響。低體溫對(duì)動(dòng)物會(huì)產(chǎn)生顯著的生理應(yīng)激，可能延長(zhǎng)恢復(fù)時(shí)間并有潛在致命風(fēng)險(xiǎn)。

在所有麻醉過(guò)程中提供額外的保溫措施。

補(bǔ)充熱源包括循環(huán)水毯、電熱墊和可在微波或水浴中加熱的市售產(chǎn)品(如等溫墊或凝膠加熱器)。

切勿直接將動(dòng)物放在熱源上。

如對(duì)使用或購(gòu)買額外的保溫來(lái)源有疑問(wèn)，請(qǐng)與您所在機(jī)構(gòu)的獸醫(yī)聯(lián)系。

補(bǔ)液：在麻醉時(shí)間較長(zhǎng)或動(dòng)物患病、老年或虛弱的情況下，考慮腹腔或皮下注射溫?zé)岬囊后w。更多信息請(qǐng)咨詢您的獸醫(yī)。

恢復(fù)：持續(xù)監(jiān)測(cè)動(dòng)物直至其完全恢復(fù)。

在干凈的籠子里，將動(dòng)物放在紙巾上(不使用墊料)。這樣可以最大程度地減少氣管阻塞或肺炎的風(fēng)險(xiǎn)。

麻醉后的動(dòng)物單獨(dú)放在一個(gè)籠子里進(jìn)行恢復(fù)。

恢復(fù)期間繼續(xù)提供額外的保溫。

當(dāng)動(dòng)物能夠走動(dòng)時(shí)，將其送回原籠中子，并提供飼料和水。

根據(jù)所進(jìn)行的手術(shù)，為了避免同籠伙伴啃縫線或切口處的創(chuàng)傷，小鼠可能需要在術(shù)后階段單獨(dú)飼養(yǎng)。任何單獨(dú)飼養(yǎng)的計(jì)劃都應(yīng)包括在IACUC方案中，以便進(jìn)行審查和批準(zhǔn)。

02 麻醉藥物和程序

吸入麻醉劑： 異氟烷是首選的吸入麻醉劑。 起效快、恢復(fù)可靠。

A. 吸入麻醉可以通過(guò)滴瓶法、誘導(dǎo)室、面罩或氣管插管使用精密蒸汽器進(jìn)行。

i.滴瓶法：

a.請(qǐng)勿使小鼠直接接觸液體吸入麻醉劑(可通過(guò)在棉花或紗布上放置不可滲透的網(wǎng)格來(lái)實(shí)現(xiàn))。

b. 由于無(wú)法控制室內(nèi)的麻醉劑濃度，并且濃度可能迅速達(dá)到有毒水平，因此該方法僅適用于非常短的手術(shù)，如尾部活檢、皮下腫瘤植入或面罩麻醉前的誘導(dǎo)。

ii.誘導(dǎo)室、面罩和氣管插管：

a.這些需要配備氧氣源和精密蒸發(fā)器的氣體麻醉機(jī)。一些研究單位可能使用室內(nèi)空氣而不是純氧作為氣源，這也是可接受的。

b.蒸發(fā)器必須與特定的吸入麻醉劑兼容。

c.由于小鼠呼吸能力較小，使用非循環(huán)呼吸系統(tǒng)。

iii. 當(dāng)使用吸入性麻醉時(shí)，使用通風(fēng)柜或配備氣體清除系統(tǒng)的麻醉系統(tǒng)，以盡量減少職業(yè)暴露于排出氣體。

B. 注射麻醉劑：氯胺酮/賽拉嗪聯(lián)合使用是小鼠的首選注射麻醉劑。

下面列出了其他常用的注射劑。

i. 小鼠對(duì)各種麻醉藥的敏感性差異顯著。 年齡、體質(zhì)、品系、健康狀況、基因調(diào)控和性別等因素都可能影響麻醉敏感性。以下劑量?jī)H為一般指導(dǎo)原則，基于上述因素可能存在顯著差異。在您的方案中添加麻醉劑時(shí)，建議提供一個(gè)范圍，以允許根據(jù)每只動(dòng)物的特定需求進(jìn)行給藥。

ii. 不建議在小鼠中進(jìn)行肌肉注射(IM)，因?yàn)榭赡軐?dǎo)致組織刺激、跛行和自殘等并發(fā)癥。

*一個(gè)很好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺酮和 7 mg/kg 塞拉嗪。**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍于右美托咪定體積的阿替美唑(5 mg/mL)來(lái)逆轉(zhuǎn)右美托咪定。然而，阿替美唑的安全范圍非常高，因此如果逆轉(zhuǎn)非常緊急，給予右美托咪定等體積的阿替美唑，可使阿替美唑的劑量增加 10 倍，這是安全的。

同樣，使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉(zhuǎn)也有效。雖然塞拉嗪具有更高的濃度(20 mg/mL)，但阿替美唑(5 mg/mL)更純凈，且與α2 受體結(jié)合更緊密，因此等體積逆轉(zhuǎn)塞拉嗪也可行。

C. 注射麻醉劑的一種類型是局部麻醉劑。

i. 局麻藥通過(guò)特異性結(jié)合神經(jīng)細(xì)胞膜上的電壓門控 Na + 通道來(lái)阻斷神經(jīng)沖動(dòng)。

ii. 給藥途徑包括粘膜(鼻、眼等)局部給藥或直接注射到組織和神經(jīng)束周圍。

iii. 在疼痛刺激(如切口)之前給予局部麻醉劑被認(rèn)為是輔助鎮(zhèn)痛藥物，與阿片類和 非甾體抗炎藥(NSAID)一起使用。

iv. 由于持續(xù)時(shí)間較短(數(shù)小時(shí))，不鼓勵(lì)將局部麻醉劑作為主要鎮(zhèn)痛藥物使用，

03 對(duì)小鼠麻醉的特殊考慮：仔鼠麻醉

目前文獻(xiàn)中描述了幾種適用于新生嚙齒動(dòng)物的麻醉方法，包括注射麻醉、吸入麻醉和低溫麻醉。

新生嚙齒動(dòng)物的麻醉會(huì)導(dǎo)致親代啃食后代的問(wèn)題。可通過(guò)確保新生仔鼠完全恢復(fù)后再歸還給母鼠來(lái)減少這種情況。其他措施包括讓幼仔接觸來(lái)自于母鼠籠中的污染墊料，并將幼仔放在窩仔中間位置。

低溫麻醉

低溫麻醉只適用于7日齡以下的新生嚙齒動(dòng)物，并且不應(yīng)用于持續(xù)時(shí)間超過(guò)30分鐘的手術(shù)。

動(dòng)物不應(yīng)直接置于冰上(在動(dòng)物和底層冰浴之間使用乳膠手套或其他物質(zhì))。

當(dāng)足部反射消失時(shí)，動(dòng)物已達(dá)到適當(dāng)?shù)穆樽硭健?/p>

手術(shù)過(guò)程中請(qǐng)勿使用白熾燈，因?yàn)樗鼤?huì)使手術(shù)區(qū)域變熱，導(dǎo)致動(dòng)物從手術(shù)麻醉狀態(tài)中蘇醒。

麻醉后，動(dòng)物應(yīng)緩慢復(fù)溫。快速升溫可能會(huì)導(dǎo)致組織損傷。可使用循環(huán)水毯、加熱墊 (40℃) 或培養(yǎng)箱 (33℃) 中給動(dòng)物重新升溫。

幼仔能夠在無(wú)直接物理刺激的情況下移動(dòng)后，可將其歸還給母鼠。

吸入麻醉

新生嚙齒動(dòng)物可能比成年嚙齒動(dòng)物需要更長(zhǎng)的吸入麻醉誘導(dǎo)時(shí)間。

在麻醉盒中進(jìn)行誘導(dǎo)通常需 5% 異氟烷，維持(麻醉誘導(dǎo)盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注射麻醉

氯胺酮/塞拉嗪是 7 日齡以上小鼠的推薦注射麻醉劑：通過(guò) 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最大體積 = 0.5 mL)。

對(duì)于7日齡以上的小鼠，推薦使用氯胺酮/塞拉嗪作為注射麻醉劑：使用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(最大體積=0.5 ml)。

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